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Diseños adecuados para la selección de condiciones de PCR con un Termociclador PCR

Los diseños adecuados para la selección de condiciones de PCR con un termociclador PCR pueden jugar un papel crítico en la realización de la reacción de PCR de manera exitosa, si las condiciones de PCR no se seleccionan cuidadosamente, el resultado final puede ser una erosión o una falta de producto útil para una aplicación posterior de PCR. 

Por lo tanto, escoger un diseño apropiadamente seleccionado y optimizado es una herramienta esencial para la determinación de los parámetros de PCR óptimos para cada experimento; los primeros pasos para el diseño adecuado para la selección de las condiciones de PCR con un termociclador PCR es seleccionar los componentes adecuados para la reacción. 

La selección de componentes del termociclador es fundamental para obtener las mejores condiciones del mismo

Los componentes básicos de una reacción básica de PCR incluyen los inmunizadores de PCR, los desoxirribonucleótidos que se utilizan como suministradores de nitrógeno para la síntesis de ADN y la temperatura apropiada para la extensión del ADN durante la reacción. 

Una vez que se haya seleccionado una mezcla de componentes, se recomienda crear una PCA para conducir algunas pruebas de optimización rápida, esto determinará en tiempo real de pH, la concentración de magnesio, la concentración de dNTPs y la temperatura óptima para la síntesis del ADN dentro del termociclador PCR. 

Objetivos para optimizar la amplificación del adn con el uso de un termociclador en las investigaciones de laboratorios 

Es recomendable realizar una amplificación cinética para superar la inhibición de PCR, esta técnica ayuda a asegurar que los productos de adn se amplifican de manera uniforme sin interferencia durante la reacción; el objetivo de esta etapa es optimizar el tiempo de ciclo de incubación para obtener la máxima calidad de los productos de PCR. 

Esto implica la realización de varias pruebas en diferentes rangos de tiempo para ver cuál es la mejor duración de incubación; así mismo, debe verificarse la integridad del producto amplificado, esto se puede realizar utilizando la electroforesis en gel para la visualización del producto. 

Si los investigadores siguen las etapas de diseño adecuadas, se pueden obtener los mejores resultados para casi cualquier experimento de PCR

Esta técnica ayuda a garantizar que los productos amplificados por PCR sean de calidad adecuada para procesar; la cantidad de producto es también un parámetro importante para verificar, ya que se puede utilizar para determinar si el diseño de la reacción de PCR es efectivo. 

En resumen, la selección de condiciones adecuadas para la PCR con un termociclador PCR requiere un diseño cuidadosamente seleccionado para obtener los mejores resultados, este diseño comienza con la selección de los componentes adecuados, una PCA para el ajuste de parámetros, la amplificación cinética para superar la inhibición de PCR y la verificación del producto amplificado. 

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